Предпазни мерки за PCR епруветка

грунд

Праймерите са ключът към успеха или неуспеха на PCR реакцията. За да се гарантира точността и ефективността на усилването, дизайнът на праймерите трябва да следва следните принципи:

Една и съща последователност от гени в различни региони може да бъде получена чрез търсене на една и съща последователност от гени в различни видове чрез софтуера NCBI

Дължина на праймера: 15-28bp, по-дълъг от 38 bp, ще увеличи температурата на отгряване, което не е благоприятно за усилването на общия ензим Taq

Съдържанието на GC в праймерите е 40 процента - 60 процента, а стойността на TM е най-добре близо до 72 градуса

Поради дегенерацията на кодона, 3' края на праймера трябва да избягва третата позиция на кодона (за предпочитане T)

Основното разпределение е разпръснато, с не повече от 3 последователни g или C в края на 3'

Самият грунд не трябва да образува структура на фиби. След завършване на дизайна на грунда, той трябва да бъде проверен чрез взривяване